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HPLC高效液相色谱分析法
发布时间:2024-06-01       浏览人次:0

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高效液相色谱分析法(HPLC),它的基本概念及理论基础(如保留值、塔板理论、速率理论、容量因子、分离度等),与气相色谱是一致的,但又有不同之处。


高效液相色谱与气相 色谱的主要区别可归结于以下几点:


(1) 进样方式的不同:高效液相色谱只要将样品制成溶液,而气相色谱需加热气化或裂 解;


(2) 流动相的不同,在被测组分与流动相之间、流动相与固定相之间都存在着一定的相 互作用力;


(3) 由于液体的粘度较气体大两个数量级,使被测组分在液体流动相中的扩散系数比在 气体流动相中约小4~5个数量级;


(4) 由于流动相的化学成分可进行广泛选择,并可配置成二元或多元体系,满足梯度洗 脱的需要,因而提高了高效液相色谱的分辨率(柱效能);


(5) 高效液相色谱采用5~10Lm细颗粒固定相,使流体相在色谱柱上渗透性大大缩小,流动阻力增大,必须借助高压泵输送流动相;


(6) 高效液相色谱是在液相中进行,对被测组分的检测,通常采用灵敏的湿法光度检测 器,例如,紫外光度检测器、示差折光检测器、荧光光度检测器等;


(7) 液相色谱与气相色谱相比较,高效液相色谱同样具有高灵敏度、高效能和高速度的 特点。 高效液相色谱的定性和定量分析,与气相色谱分析相似, 在定性分析中,采用保留值定性,或与其他定性能力强的仪器分析法连用;在定量分析中,采用测量峰面积的归一化法、内标法或外标法等,但高效液相色谱在分离复杂组分式样时,有些组分常不能出峰,因此归一化法定量受到限制,而内标法定量则被广泛使用。


根据物质的光谱来鉴别物质及确定它的化学组成和相对含量的方法叫光谱分析。其优点是灵敏,迅速.历史上曾通过光谱分析发现了许多新元素,如铷,铯,氦等.根据分析原理光谱分析可分为发射光谱分析与吸收光谱分析二种;根据被测成分的形态可分为原子光谱分析与分子光谱分析。光谱分析的被测成分是原子的称为原子光谱,被测成分是分子的则称为分子光谱。


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